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• 去除殘留溶劑：消除生產(chǎn)或儲(chǔ)存過(guò)程中殘留的有機(jī)溶劑（如甲醇、乙腈）。
• 平衡固定相：使固定相表面充分潤(rùn)濕，形成穩(wěn)定的分離層。
• 提高柱效：恢復(fù)色譜柱的分離性能，確保峰形對(duì)稱、保留時(shí)間穩(wěn)定。
  

• 正相體系（常用）：
  • 初始流動(dòng)相：正己烷-異丙醇（90:10，v/v）或純正己烷（根據(jù)柱子說(shuō)明書調(diào)整）。
  • 梯度活化：若柱子說(shuō)明書推薦梯度活化，可按以下比例逐步過(guò)渡：
    • 階段1：正己烷-異丙醇（95:5，v/v）
    • 階段2：正己烷-異丙醇（90:10，v/v）
    • 階段3：正己烷-異丙醇（85:15，v/v）
    • 每個(gè)階段運(yùn)行10-20倍柱體積（CV），流速0.5-1.0 mL/min。
      
    
    
• 反相體系（少數(shù)情況）：
  • 若柱子設(shè)計(jì)為反相模式（如C18改性氨基柱），需用甲醇-水（80:20，v/v）或純甲醇活化。
    
  
  

• 將色譜柱按流動(dòng)相流向（通常箭頭標(biāo)識(shí)）正確安裝到液相色譜系統(tǒng)中。
• 確保系統(tǒng)管路、過(guò)濾器、進(jìn)樣閥等部件清潔，避免二次污染。
  

• 低流速啟動(dòng)：以0.1-0.2 mL/min的流速緩慢注入流動(dòng)相，避免壓力突變損壞柱床。
• 逐步提高流速：待壓力穩(wěn)定后，將流速升至0.5-1.0 mL/min（根據(jù)柱子規(guī)格調(diào)整）。
• 持續(xù)沖洗：
  • 正相體系：沖洗20-50倍柱體積（CV），直至基線平穩(wěn)。
  • 反相體系：沖洗10-20倍柱體積（CV）。
    
  
  

• 活化完成后，用分析用流動(dòng)相（如正己烷-異丙醇-乙酸，90:9:1，v/v/v）平衡色譜柱10-20倍柱體積，確保分離條件穩(wěn)定。
  

• 避免壓力沖擊：
  • 活化時(shí)流速需從低到高逐步調(diào)整，防止柱床塌陷或固定相脫落。
  • 關(guān)閉泵或更換流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)先降流速至零，再操作。
    
• 防止柱子干燥：
  • 活化過(guò)程中及完成后，色譜柱需始終保持潤(rùn)濕狀態(tài)。若需暫停使用，應(yīng)用活化溶劑充滿柱子并密封兩端。
    
• 兼容性檢查：
  • 確?；罨軇┡c分析方法兼容。例如，若后續(xù)分析使用含水的流動(dòng)相，活化后需用無(wú)水溶劑過(guò)渡，避免固定相水解。
    
• 溫度控制：
  • 正相色譜柱通常在室溫下活化，避免高溫（>40℃）導(dǎo)致固定相變性。
    
• 特殊柱子處理：
  • 若柱子說(shuō)明書推薦特定活化程序（如使用極性溶劑預(yù)處理），需嚴(yán)格遵循。例如，某些氨基柱需先用二氯甲烷沖洗以去除殘留硅醇基。