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多重光散射儀(Multi-Angle Light Scattering, MALS)和動(dòng)態(tài)光散射儀(Dynamic Light Scattering, DLS)是兩種常見的光散射技術(shù),它們?cè)谠?、?yīng)用場景和測量參數(shù)上有顯著區(qū)別。以下是兩者的詳細(xì)對(duì)比: 1. 原理多重光散射儀(MALS)
通過測量樣品在不同角度(通常為多個(gè)固定角度)下的散射光強(qiáng)度,分析散射光的角度依賴性。 結(jié)合濃度信息(如通過折射率檢測器),可以計(jì)算絕對(duì)分子量(Mw)、均方根半徑(Rg)等參數(shù)。 通常與尺寸排阻色譜(SEC)或場流分離(FFF)聯(lián)用,用于復(fù)雜樣品的分離和表征。
動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS) 通過測量散射光強(qiáng)度的波動(dòng)(由布朗運(yùn)動(dòng)引起),分析光強(qiáng)隨時(shí)間的變化(自相關(guān)函數(shù))。 基于斯托克斯-愛因斯坦方程,計(jì)算顆粒的流體力學(xué)半徑(Rh)和粒徑分布。 適用于測量納米顆粒、膠體、蛋白質(zhì)等樣品的粒徑和分散性。
2. 測量參數(shù)多重光散射儀(MALS)
絕對(duì)分子量(Mw):無需標(biāo)準(zhǔn)品即可測定。 均方根半徑(Rg):反映分子或顆粒的尺寸和形狀。 第二維里系數(shù)(A2):反映分子間相互作用。 適用于大分子(如蛋白質(zhì)、聚合物)和復(fù)雜體系(如聚集體、共軛物)的表征。
動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS) 流體力學(xué)半徑(Rh):反映顆粒在溶液中的有效尺寸。 粒徑分布:提供多分散性指數(shù)(PDI),評(píng)估樣品的均一性。 適用于納米顆粒、膠體、蛋白質(zhì)等樣品的快速粒徑分析。
3. 應(yīng)用場景多重光散射儀(MALS)
高分子科學(xué):聚合物分子量和構(gòu)象分析。 生物制藥:蛋白質(zhì)聚集、抗體-抗原復(fù)合物分析。 納米材料:納米顆粒的尺寸和形狀表征。 通常與分離技術(shù)(如SEC-MALS)聯(lián)用,用于復(fù)雜樣品的分離和表征。
動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS)
4. 樣品要求多重光散射儀(MALS)
樣品需具有一定濃度(通常為 mg/mL 級(jí)別)。 樣品需透明或微濁,避免高濃度或高濁度樣品(可能影響光散射信號(hào))。 通常與分離技術(shù)聯(lián)用,適合復(fù)雜樣品的分析。
動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS) 樣品濃度較低(通常為 μg/mL 級(jí)別)。 樣品需透明或微濁,避免高濃度或高濁度樣品(可能導(dǎo)致多重散射)。 適合均一性較好的樣品,對(duì)多分散性樣品的分辨率較低。
5. 優(yōu)缺點(diǎn)多重光散射儀(MALS)
優(yōu)點(diǎn):
提供絕對(duì)分子量和尺寸信息。 可分析復(fù)雜樣品(如聚集體、共軛物)。
缺點(diǎn):
動(dòng)態(tài)光散射儀(DLS) 優(yōu)點(diǎn):
快速、簡便,適合常規(guī)粒徑分析。 非破壞性測量,樣品可回收。
缺點(diǎn): 對(duì)多分散性樣品的分辨率較低。 無法提供絕對(duì)分子量信息。
總結(jié)選擇哪種儀器取決于實(shí)驗(yàn)需求:如果需要分子量和尺寸的詳細(xì)信息,選擇MALS;如果僅需粒徑和分散性數(shù)據(jù),選擇DLS。
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