動(dòng)物細(xì)胞模型怎么做？

儀器千里

制作動(dòng)物細(xì)胞模型需根據(jù)研究目標(biāo)選擇方法，以下是常見(jiàn)流程：
1、原代細(xì)胞模型：取動(dòng)物組織(如小鼠肝臟)，剪碎后用胰酶消化分散成單細(xì)胞，接種于含血清的培養(yǎng)基，在 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)后用于實(shí)驗(yàn)，可保留組織特異性，但傳代次數(shù)有限。

2、永生化細(xì)胞模型：對(duì)原代細(xì)胞通過(guò)病毒轉(zhuǎn)化(如 SV40)或基因編輯使其無(wú)限增殖，如 HeLa 細(xì)胞、RAW264.7 巨噬細(xì)胞等，適合長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)和大規(guī)模篩選，但需注意功能差異。

3、基因修飾模型：用 CRISPR/Cas9 敲除或過(guò)表達(dá)目標(biāo)基因，或通過(guò) RNAi 沉默特定基因，構(gòu)建疾病相關(guān)細(xì)胞模型(如敲除 p53 的癌細(xì)胞模型)，需通過(guò)測(cè)序驗(yàn)證基因編輯效果。

4、類(lèi)器官模型：將干細(xì)胞或器官前體細(xì)胞在三維培養(yǎng)基中誘導(dǎo)分化，形成模擬器官結(jié)構(gòu)的類(lèi)器官(如腸道類(lèi)器官)，需調(diào)控細(xì)胞因子誘導(dǎo)分化，通過(guò)免疫熒光驗(yàn)證結(jié)構(gòu)完整性。
制作后需檢測(cè)細(xì)胞活性、形態(tài)及目標(biāo)標(biāo)志物，確保模型符合實(shí)驗(yàn)需求。

zhizao11

看了大家的討論，感覺(jué)思路更加開(kāi)闊了。