動物細胞模型怎么做？

儀器千里

制作動物細胞模型需根據研究目標選擇方法，以下是常見流程：
1、原代細胞模型：取動物組織(如小鼠肝臟)，剪碎后用胰酶消化分散成單細胞，接種于含血清的培養(yǎng)基，在 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細胞貼壁生長后用于實驗，可保留組織特異性，但傳代次數(shù)有限。

2、永生化細胞模型：對原代細胞通過病毒轉化(如 SV40)或基因編輯使其無限增殖，如 HeLa 細胞、RAW264.7 巨噬細胞等，適合長期實驗和大規(guī)模篩選，但需注意功能差異。

3、基因修飾模型：用 CRISPR/Cas9 敲除或過表達目標基因，或通過 RNAi 沉默特定基因，構建疾病相關細胞模型(如敲除 p53 的癌細胞模型)，需通過測序驗證基因編輯效果。

4、類器官模型：將干細胞或器官前體細胞在三維培養(yǎng)基中誘導分化，形成模擬器官結構的類器官(如腸道類器官)，需調控細胞因子誘導分化，通過免疫熒光驗證結構完整性。
制作后需檢測細胞活性、形態(tài)及目標標志物，確保模型符合實驗需求。

zhizao11

看了大家的討論，感覺思路更加開闊了。