產(chǎn)品描述
細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí), 會(huì)激活一些 DNA 內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組 DNA,產(chǎn)生180bp-200bp 的 DNA 片段,表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)的特異的梯狀 Ladder 圖譜。基因組 DNA 雙鏈或單鏈斷裂時(shí)會(huì)出現(xiàn)產(chǎn)生大量的粘性 3'-OH 末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化作用下,與dUTP 結(jié)合,從而通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀直接進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(Terminal - deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有 DNA 的斷裂,因而沒有 3'-OH 形成,很少能夠被染色。Tunel 法可以對完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可檢測出極少量的凋亡細(xì)胞,因而在細(xì)胞凋亡的研究中廣泛采用。 本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況??蛇x擇性的檢測凋亡細(xì)胞,而非壞死細(xì)胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細(xì)胞。本試劑盒檢測細(xì)胞凋亡,耗時(shí)短,只需一步染色反應(yīng),洗滌后即可檢測。
訂購信息 產(chǎn)品名稱 | | | | | | EZ 594 TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(紅色熒光) | | |
產(chǎn)品組分 組分 | 20 T | 50 T | A.EZ 594 TUNEL Reaction Buffer | 1 mL | 2 × 1.25 mL | B.TdT Enzyme | 40 μL | 100 μL | C.Proteinase K (2 mg/mL) | 40 μL | 100 μL | D.DNase I (2 U/μL) | 5 μL | 13 μL | E.10 × DNase I Buffer | 100 μL | 260 μL |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光保存,有效期24個(gè)月。【注】:組分 A 需避光保存,避免反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)材料(自備)
PBS緩沖液(1×,pH~7.4)
0.4% Triton X-100(PBS配制)
0.1% Triton X-100(PBS配制,其中含5 mg/mL BSA)
4%多**醛(PBS配制)
免疫組化筆
脫蠟溶劑(石蠟切片樣本)
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