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液相色譜柱分離原理

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發(fā)表于 2025-8-22 17:20:27 | 只看該作者 |倒序?yàn)g覽 |閱讀模式
液相色譜柱的分離原理基于分配作用和吸附作用,具體來(lái)說(shuō),分離過(guò)程是通過(guò)樣品中不同組分與色譜柱中固定相的相互作用來(lái)進(jìn)行的。主要原理包括:  
1、分配作用:這是液相色譜最常見(jiàn)的分離機(jī)制。固定相和流動(dòng)相之間的不同親和力導(dǎo)致樣品中各組分在兩者之間分配不同的比例。某些組分對(duì)固定相的親和力較強(qiáng),會(huì)在柱中停留更長(zhǎng)時(shí)間,而對(duì)流動(dòng)相親和力較強(qiáng)的組分則較早洗脫,從而實(shí)現(xiàn)分離。  
2、吸附作用:在某些類(lèi)型的液相色譜(如反相色譜和正相色譜)中,組分與固定相之間的吸附力會(huì)影響其在色譜柱中的停留時(shí)間。不同組分對(duì)固定相的吸附能力不同,導(dǎo)致其在色譜柱中滯留時(shí)間的差異。  
3、孔隙分配:對(duì)于某些色譜柱,如凝膠滲透色譜,分子大小的差異影響物質(zhì)在固定相上的遷移速度。較大的分子因無(wú)法進(jìn)入孔隙或僅部分進(jìn)入,所以較早被洗脫;較小的分子則進(jìn)入孔隙,被延遲洗脫。  
4、電荷作用:在離子交換色譜中,樣品分子和固定相上的離子交換位點(diǎn)之間發(fā)生電荷相互作用,帶有相反電荷的離子會(huì)更強(qiáng)地吸附在柱中,影響洗脫順序。

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