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電子顯微鏡的使用方法
電子顯微鏡(Electron Microscope, EM)是一種利用電子束而非可見(jiàn)光來(lái)形成圖像的顯微設(shè)備,能夠?qū)崿F(xiàn)比光學(xué)顯微鏡更高的分辨率。根據(jù)其工作原理的不同,電子顯微鏡主要有兩種類型:透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope, TEM)和掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscope, SEM)。下面是這兩種顯微鏡的基本使用步驟概述:
透射電子顯微鏡 (TEM)
樣本制備:
樣本必須非常?。ㄍǔP∮?00納米),以允許電子束穿過(guò)。
對(duì)生物樣本進(jìn)行固定、脫水、浸透樹(shù)脂后進(jìn)行超薄切片。
非生物樣本可能需要通過(guò)研磨或其他方法減薄。
樣本加載:
使用特制的網(wǎng)格(通常由碳或金屬制成)將樣本固定住。
將樣本網(wǎng)格放置在TEM樣品架上,并插入顯微鏡。
設(shè)置參數(shù):
調(diào)整電子槍的能量和強(qiáng)度。
設(shè)定合適的放大倍數(shù)。
調(diào)節(jié)光闌孔徑以獲得最佳圖像質(zhì)量。
觀察與記錄:
觀察樣本并通過(guò)CCD相機(jī)或傳統(tǒng)膠片記錄圖像。
掃描電子顯微鏡 (SEM)
樣本制備:
樣本無(wú)需像TEM那樣極薄,但表面必須干燥且不含揮發(fā)性物質(zhì)。
如果樣本導(dǎo)電性差,則需要鍍一層金屬(如金或鉑)來(lái)改善導(dǎo)電性。
樣本加載:
將樣本固定在樣品臺(tái)上。
將樣品臺(tái)放入SEM的真空腔室內(nèi)。
設(shè)置參數(shù):
調(diào)整電子束的加速電壓。
設(shè)定掃描模式(如二次電子像或背散射電子像)。
選擇合適的放大倍數(shù)和工作距離。
觀察與記錄:
通過(guò)顯示器觀察樣本表面的詳細(xì)結(jié)構(gòu)。
使用內(nèi)置的數(shù)字相機(jī)保存圖像數(shù)據(jù)。
注意事項(xiàng)
在使用任何類型的電子顯微鏡之前,確保了解安全規(guī)程,特別是在處理有害化學(xué)品和維護(hù)真空環(huán)境時(shí)。
電子顯微鏡的操作通常需要專門(mén)訓(xùn)練,初次使用者應(yīng)在有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員指導(dǎo)下進(jìn)行。
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