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東曹生命科學(xué)近日推出第三代Protein A親和層析填料產(chǎn)品——TOYOPEARL Super A，主要用于單克隆抗體（IgG1）、IgM、鼠IgG以及Fc融合蛋白的分離純化。TOYOPEARL Super A相較于東曹上兩代Protein A填料產(chǎn)品，在耐堿性、洗脫pH和流速等方面均有顯著提升，有助于開發(fā)高效且穩(wěn)健的抗體純化工藝方法。
TOYOPEARL Super A的產(chǎn)品特點：
· 新型官能團鍵合： 采用了經(jīng)過結(jié)構(gòu)改造的新型重組Protein A配基作為官能團。 · 高動態(tài)吸附載量： 柱留時間為4分鐘時，對抗體的動態(tài)吸附載量可達到68 g/L。 · 更強的耐堿性能： 可使用0.5 mol/L NaOH循環(huán)清洗。 · 更溫和的洗脫pH： 在更溫和的酸性條件下 (pH 3.8-4.0) 即可達到95%以上的抗體回收率。 · 填料基質(zhì)剛性更強： 在大型層析柱上使用高流速也能保持穩(wěn)定的壓力-流速曲線。
表1 Super A與上兩代Protein A填料的性能對比
特點1
更高的動態(tài)吸附載量我們對比了在不同柱留時間下Super A與市售瓊脂糖Protein A填料的動態(tài)吸附載量 (DBC) 數(shù)據(jù)?？梢钥吹街魰r間＜5分鐘時，Super A的DBC更高。
圖1 柱留時間和動態(tài)吸附載量的關(guān)系
特點 2
優(yōu)異的耐堿性能圖2是Super A與其他兩款市售Protein A填料的耐堿性數(shù)據(jù)對比。使用0.5 mol/L NaOH溶液進行150次CIP清洗后，Super A的DBC依然能夠保持在90%以上。
圖2 耐堿性能的比較（0.5 mol/L NaOH CIP)
特點 3
更溫和的洗脫pH條件圖3中比較了三款Protein A填料的洗脫pH。從圖中可以看到Super A的出峰時間最早，且在pH 4.0左右時就能夠?qū)崿F(xiàn)洗脫IgG，有效抑制聚集體的形成。
圖3 抗體的洗脫pH
特點 4
穩(wěn)定的壓力-流速曲線Super A采用了經(jīng)過改進的填料骨架，比上一代Protein A填料的剛性更強，裝填至20 cm柱高的層析柱中依然可以保持平緩的壓力-流速曲線（圖4）。即使在大型層析柱中使用也能獲得良好的操作流速。
圖4 壓力-流速曲線
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發(fā)表于 2024-7-18 13:25:03
發(fā)表于 2024-7-26 10:36:16
