TA的每日心情 | 開(kāi)心 2024-8-16 13:43 |
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液相色譜(LiquidChromatography,LC)是一種用于分離、鑒定和定量混合物中各組分的分析化學(xué)技術(shù)。在液相色譜中,樣品被泵送通過(guò)裝有固定相的色譜柱,而流動(dòng)相則是推動(dòng)樣品通過(guò)色譜柱的液體。選擇合適的流動(dòng)相對(duì)于實(shí)現(xiàn)良好的分離效果至關(guān)重要。
根據(jù)液相色譜的不同類型,如高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC)、超高效液相色譜(UltraHighPerformanceLiquidChromatography,UHPLC)、反相色譜(ReversePhaseChromatography,RPC)、正相色譜(NormalPhaseChromatography,NPC)等,所使用的流動(dòng)相也會(huì)有所不同。
以下是一些常見(jiàn)的流動(dòng)相及其用途:
水-常用于配制其他溶劑或緩沖溶液的基礎(chǔ)溶劑。
甲醇(MeOH)和乙腈(ACN)-這兩種溶劑經(jīng)常用于反相色譜中,作為有機(jī)修改劑與水混合使用。
乙酸銨(NH4Ac)或甲酸(FA)-用于調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值,特別是在蛋白質(zhì)和肽類的分析中。
四氫呋喃(THF)-可以用作極性較強(qiáng)的有機(jī)溶劑,適用于某些特定類型的樣品。
二氯甲烷(DCM)和環(huán)己烷-在正相色譜中較為常見(jiàn),用于非極性化合物的分離。
磷酸鹽緩沖液(PBS)-常用于生物樣品的分析,可以穩(wěn)定pH并提供離子強(qiáng)度。
乙醇(EtOH)-有時(shí)用作甲醇或乙腈的替代品,尤其是在需要更低毒性或不同洗脫能力的情況下。
緩沖溶液-包括但不限于醋酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液等,用于控制流動(dòng)相的pH值和離子強(qiáng)度,對(duì)蛋白質(zhì)、核酸等生物分子的穩(wěn)定性尤為重要。
選擇流動(dòng)相時(shí)需考慮的因素包括樣品的性質(zhì)、待分析化合物的極性、檢測(cè)器的兼容性以及是否需要進(jìn)行梯度洗脫等。此外,還需注意溶劑的純度和兼容性,以確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。
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